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Lab scientist with Eppendorf BioSpectrometer_REG_ basic photometer in the foreground.

Detektion

Lernen Sie unser Produktportfolio kennen

Mechanism of Eppendorf _MICRO_Cuvette G1.0

Cuvettes
Front view on Eppendorf BioSpectrometer basic

Printers and Filter Sets
laboratory software, VisioNize

Sample and Information Management

Eppendorfs erster Photometer kam 1950 auf den Markt. Unsere Produktpalette heute spiegelt unser Fachwissen auf dem Gebiet der Photometrie wider und ermöglicht es Ihnen, genau die Geräte und das Zubehör zusammenzustellen, das Sie brauchen. Die Serie der Eppendorf Detektionsprodukte vereinfacht molekulare Analysen, einschließlich Nukleinsäure- und Proteinquantifizierung, kinetische Studien, ELISAs und Fluoreszenzdetektion. Zusätzlich sind mit all unseren Detektionsgeräten Mikrovolumenmessungen mit Hilfe der µCuvette G1.0 möglich.

Wann brauche ich was?

Je nach Probenkonzentration werden
verschiedene photometrische Messverfahren
empfohlen:

Extinktion

  • Schnelle und einfache direkte Messmethode
  • Ungefährlich und stabil, da keine Chemikalien eingesetzt werden müssen
  • Gibt Aufschluss über die Probenreinheit

Fluoreszenz

  • Hohe Sensitivität; daher besonders für die Analyse von Proben it geringer Konzentration geeignet; spart kostbares Probenmaterial
  • Hohe Genauigkeit durch die hohe Spezifität für das Zielmolekül

Kinetic

  • Messung über eine Zeitspanne mit verlässlicher Temperaturkontrolle der
  • Reaktionen durch den Küvettenschacht mit integriertem Peltierelement
  • Zeitsparende Bearbeitung, da das Zeitfenster nach der Messung angepasst werden kann, einschließlich statistischer Daten über die Kurvenpassung

UV/Vis-Proben

Nukleinsäuren können durch die Messung der Extinktion bei einer Wellenlänge von 260 nm in einem UV-Vis-(Spectro-)photometer quantifiziert werden. Der OD260-Wert wird zur Berechnung der Konzentration der Nukleinsäureprobe verwendet, unter Berücksichtigung des probenspezifischen Faktors.


OD260 = 1* : 50 μg/mL Doppelstrang-DNA
40 μg/mL RNA
33 μg/mL Einzelstrang-DNA

Absorbance spectra of nucleic acids and possible contaminations

Fluoreszenzproben

Die UV-basierte Quantifizierung von Nukleinsäuren hat Grenzen, die durch Fluoreszenzdetektion, qPCR, oder Chip-Kapillarelektrophorese-Systeme überwunden werden können.

Die Menge an Nukleinsäure wird auf der Grundlage der Intensität des Fluoreszenzsignals gemessen. Für die Anregung und Detektion wird ein Fluorometer oder ein Photometer mit Fluoreszenz-Modul benötigt.

Die Quantifizierung von Nukleinsäuren anhand von Fluoreszenz erfolgt mittels fluoreszierenden Farbstoffen, die sich an die Nukleinsäuren binden. Nur die aus Nukleinsäure und Farbstoff bestehenden Komplexe werden durch das Licht einer bestimmten Wellenlänge angeregt (je nach verwendetem Farbstoff) und geben somit Licht mit einer etwas längeren Wellenlänge ab.

Kinetischer Prozess

Messungen der Enzymaktivität müssen sehr oft bei einer bestimmten Temperatur durchgeführt werden. Um Messabweichungen zu reduzieren, muss der Küvettenschacht des Spektrometers temperierbar sein.

Die Enzymaktivität [U/mg] kann zeitaufwendig von Hand oder schnell und einfach mit einem Spektrometer gemessen werden. Dabei ist die softwarebasierte »lineare Regression «ein hilfreicher Faktor bei der präzisen Bestimmung des linearen Bereichs einer kinetischen Messung.

Transmissionsproben

Die Transmission wird auf Basis des Verhältnisses von l (durch die Küvette durchgelassenes Licht) zu I0 (in die Küvette einfallendes Licht) berechnet und in Prozent als %T angegeben.

Alternativ zu den Datenausgaben für Extinktion und Konzentration, haben Sie mit der vorprogrammierten Methode Transmission des BioPhotometer D30 und der BioSpectrometer die Möglichkeit, die prozentuale Transmission der Probe zu ermitteln. Bei der Methode Transmission wird die Lichtdurchlässigkeit der Probe als ein Wert T% an Stelle des Extinktionswerts ausgegeben, der dann direkt zur Berechnung der Probenkonzentration verwendet werden kann. Diese Rohdaten sind auch als Grundlage für weitere Berechnungen geeignet.

T = I/I0
%T = I/I0 * 100
Das Photometer berechnet die Extinktion (A) automatisch
anhand der gemessenen Transmission (T).
A = -log10T = lg(I0/I)

Nervt Sie unpraktische Handhabung?

Die Ergonomie geht weit über den "ergonomisch gestalteten Stuhl" hinaus. Bereits Anfang der 70er Jahre begann Eppendorf mit der ergonomischen Optimierung der Laborgeräte. Im Jahr 2003 haben wir das PhysioCare-Konzept gestartet, das sich auf ergonomische Liquid-Handling-Geräte wie unsere Pipetten konzentriert.

Heute wird das Eppendorf PhysioCare Konzept um weitere Laborprodukte als ganzheitliche Lösung erweitert, um den Arbeitsablauf in Ihrem Labor mit Ihrer Gesundheit und Ihrem Wohlbefinden zu harmonisieren, z.B. für das Eppendorf BioSpectrometer:

  • Geführte Software für einfache Handhabung
  • Klare Anzeigen am Küvettenschaft für eine einfache Handhabung
  • Direkte Tasten für eine komfortable Bedienung
  • Geringe Standfläche, um die Position in direkter Armreichweite an Ihrer Bank zu ermöglichen.
  • Standardisiertes "User-Interface-Konzept" zur intuitiven Bedienung von Geräten

Weitere Informationen zum Eppendorf PhysioCare Konzept!

Kämpfen Sie mit papierbasierter Dokumentation?

Das eLabJournal Electronic Lab Notebook bietet eine intuitive und flexible Lösung zur Dokumentation von Forschungsdaten wie z. B. BioSpectrometer basierten Werten. Verbessern Sie die Effizienz bei der Dokumentation, Organisation, Suche und Archivierung gesammelter Daten. Mit dem kostenlosen eLabJournal add-ons können Sie die Funktionalität von eLabJournal zu einem vollständig integrierten Laboratory Information Management System erweitern.

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Eines der ersten Photometer für Labore

Vielleicht haben Sie Ihre Grundausbildung im Labor mit einem von uns bekommen... Basierend auf fast 70 Jahren Erfahrung in der Photometrie hat Eppendorf im Laufe der Jahre viele verschiedene Photometer entwickelt…

Verifizierung von Spektral-
photometern

Viele Laboratorien unterliegen behördlichen Anforderungen, die z.B. durch Qualitätsmanagementsysteme vorgeschrieben sind. Diese Laboratorien sind daher verpflichtet, Arbeitsmittel und Analysengeräte, darunter auch (Spektro-)Photometer, regelmäßig zu prüfen.

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Fluoreszenz - sinnvolle Ergänzung zur Extinktion?

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Überwachung der Wachstumsrate der mikrobiellen Kultur

Kann ich mit meinen prokaryotischen Zellen fortfahren oder muss ich noch eine Stunde warten? Eine ausreichende Wachstumsrate ist für mikrobielle Zellen erforderlich, bevor Sie mit der Ernte oder dem Start Ihrer Hauptkultur beginnen. Eine typische Wachstumsprüfung kann durch OD600 mit Ihrem Photometer durchgeführt werden.

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